| 產(chǎn)品編號(hào) | C6135 |
| 英文名稱 | Mycoplasma Treatment Reagent |
| 中文名稱 | 支原體清除劑 |
| CAS | |
| 保存條件 | -20℃保存，1年. |
| 注意事項(xiàng) | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
| 產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品介紹： 支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中常遇到的問(wèn)題。支原體污染可以改變細(xì)胞的特性，例如部分支原體會(huì)快速消耗培養(yǎng)基中的精氨酸，與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)，從而使細(xì)胞的生長(zhǎng)速度減慢或停止；同時(shí)支原體還可以改變細(xì)胞的酶譜、細(xì)胞膜成分，造成細(xì)胞染色體異常或細(xì)胞病理性改變等。上述情況會(huì)嚴(yán)重影響到使用這些細(xì)胞所做實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)論不可靠。 本產(chǎn)品是復(fù)合抗生素制劑，含有兩種有效成分，分別作用于支原體的核糖體和DNA螺旋酶，抑制蛋白質(zhì)的合成， 破壞細(xì)胞膜的完整性，及抑制支原體DNA的合成和復(fù)制。且所含組分可穿透哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜，可同時(shí)除去游離形式及胞內(nèi)的支原體，從而確保經(jīng)過(guò)處理的細(xì)胞不會(huì)被胞內(nèi)釋放的支原體再次感染。使用此支原體清除劑1-2周即可殺滅90%以上的支原體，且對(duì)細(xì)胞毒副作用少。同時(shí)，本產(chǎn)品對(duì)革蘭氏陰性及陽(yáng)性菌均有抑制作用。 操作說(shuō)明： 在無(wú)菌條件下，拿一管去除試劑粉末(125mg)加入10ml滅菌水，振蕩溶解，配成100×儲(chǔ)存液，過(guò)濾分裝后-20°C保存。使用時(shí)按1：100的比例加至完全培養(yǎng)基中，配制成1×的工作培養(yǎng)基。 細(xì)胞傳代時(shí)，離心去除培養(yǎng)上清后，用1×的工作培養(yǎng)基正常培養(yǎng)及傳代1-2周。傳代時(shí)用PBS洗細(xì)胞1-2次可提高支原體清除效率。 建議： 1. 用本產(chǎn)品處理細(xì)胞至常規(guī)PCR檢測(cè)結(jié)果為陰性后，仍可能有痕量支原體殘留，應(yīng)再處理1周，并繼續(xù)檢測(cè)。若檢測(cè)結(jié)果仍為陰性，可嘗試撤去試劑正常培養(yǎng)2周，同時(shí)維持檢測(cè)頻率，確保結(jié)果沒(méi)有反彈。正常培養(yǎng)2周后，若結(jié)果均為陰性，則該細(xì)胞為完全治愈，可減少檢測(cè)頻率。這樣為一個(gè)完整的治療過(guò)程。若出現(xiàn)反彈，細(xì)胞需要重新開(kāi)始一個(gè)完整的療程。 2. 在實(shí)驗(yàn)室條件允許情況下，用兩臺(tái)培養(yǎng)箱分別培養(yǎng)受感染與“干凈”的細(xì)胞，在做去除處理的細(xì)胞暫時(shí)與受感染的細(xì)胞放一個(gè)培養(yǎng)箱，至檢測(cè)結(jié)果為陰性后，轉(zhuǎn)至另一培養(yǎng)箱觀察。同樣，如果條件允許，分別在不同的超凈臺(tái)處理受感染和“干凈”的細(xì)胞，耗材及試劑也應(yīng)分開(kāi)使用。若條件不允許，也盡可能做到受感染的、在做去除處理的與“干凈”的細(xì)胞分層放置。不同的細(xì)胞分開(kāi)處理，優(yōu)先處理“干凈”的細(xì)胞，后處理在做去除的和受感染的細(xì)胞。試劑分開(kāi)使用，“干凈” 的細(xì)胞優(yōu)先使用耗材，已開(kāi)封但未使用完的耗材只處理受感染的細(xì)胞，盡最大可能減少交叉感染的可能性。 常見(jiàn)問(wèn)題： 1. 為什么做去除處理后培養(yǎng)基中的黑點(diǎn)沒(méi)有減少？ 答：目前學(xué)術(shù)界對(duì)黑點(diǎn)是什么尚無(wú)定論，有人認(rèn)為是細(xì)胞碎片，也有人認(rèn)為是無(wú)機(jī)物、真菌、 細(xì)菌甚至是黑膠蟲(chóng)等等，而黑點(diǎn)的出現(xiàn)與支原體感染的相關(guān)性也沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道。所以黑點(diǎn)的多少不能反映支原體的多少。 2. 為什么會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞反復(fù)感染的情況？ 答：支原體可以通過(guò)氣溶膠傳播，和受感染的細(xì)胞共用試劑與耗材極易產(chǎn)生交叉污染的問(wèn)題， 從而導(dǎo)致剛殺滅支原體的細(xì)胞恢復(fù)正常培養(yǎng)后被重新感染。而人體的皮膚及口腔中也存在支原體，不規(guī)范的操作（如不戴手套處理細(xì)胞、操作過(guò)程中不戴口罩并隨意交談等），都很容易將剛殺滅支原體的細(xì)胞重新感染。因此，樹(shù)立嚴(yán)格的操作規(guī)范并堅(jiān)持執(zhí)行才是避免細(xì)胞反復(fù)感染的有效途徑。 |
