為何優(yōu)化流式實驗？
流式細胞術(shù)(FCM)工作流程中的所有步驟對獲取可發(fā)表的高品質(zhì)圖像都至關(guān)重要。尤其是利用正確的抗體去識別抗原以及放大信號是實現(xiàn)最佳顯示的關(guān)鍵。每年不斷有高分文獻引用Bioss流式抗體。
在選擇好抗體，設(shè)置好對照之后結(jié)果仍不理想，可以從以下三方面考慮優(yōu)化細節(jié)：
一、優(yōu)化抗體使用濃度
圖1.為細胞對不同濃度的BMAL1(bs-3750R)、Jak3(bs-2808R)染色結(jié)果，可以看出抗體使用量不同時，陽性峰偏移程度有所不同。
如圖2.所示，死細胞的自發(fā)熒光水平很高，且容易攝取抗體導(dǎo)致非特異性結(jié)合，最終影響實驗結(jié)果;還可能會釋放DNA，DNA非常粘稠，會導(dǎo)致細胞成團，容易堵塞管路。
圖2. 全部細胞(All)與活細胞(Live)自發(fā)熒光區(qū)別
? 蛋白結(jié)合染料：結(jié)合細胞表面或膜內(nèi)的游離胺，活細胞弱陽，死細胞強陽?？梢杂迷诠潭吮局械?，區(qū)分樣本固定細胞狀態(tài)。
圖3. 小鼠脾細胞7-AAD染色結(jié)果
Fc受體是指細胞表面能夠與免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE和IgD)結(jié)合的分子，存在于NK 細胞、肥大細胞、巨噬細胞、中性粒細胞的表面。FcR 能夠與抗體的Fc段結(jié)合，在檢測時產(chǎn)生假陽性，圖4. 為FcR 封閉前后陽性結(jié)果對比。
圖5. 小鼠脾臟T cell、B cell分析
本服務(wù)項目主要是利用流式細胞儀和熒光標記抗體對客戶提供的細胞樣品或全血樣品進行檢測分析?？蓹z測的項目有：細胞周期檢測、細胞凋亡檢測、免疫細胞分型、細胞表面抗原鑒定、同城上機檢測。
六、流式抗體部分高分文獻
